2012年6月5日上午,长江所鱼病室培养的三名硕士研究生高正勇、张金风、苏岚进行了毕业论文答辩,他们答辩的题目分别为:大鲵重要疾病病原学与诊断技术研究、草鱼呼肠孤病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法的建立和草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白在毕赤酵母中的表达。
   高正勇同学的研究工作为大鲵重要病害的病原分离鉴定与疾病诊断方法。从患病大鲵体内分离鉴定了细菌病原弗氏柠檬酸杆菌,研究了其致病性、分子进化特征以及药物敏感特性;查明了大鲵虹彩病毒的理化特性与生物学特性,建立了大鲵虹彩病毒MCP基因的克隆与原核表达技术,并实现了高效原核表达;通过制备MCP蛋白多克隆抗体,建立了在细胞培养物上和患病大鲵体内检测大鲵虹彩病毒的免疫诊断方法。
草鱼出血病的诊断一直缺乏可现场应用的诊断方法。张金风同学研究的草鱼呼肠孤病毒逆转录环介导等温扩增技术检测方法不依赖昂贵仪器,可应用于现场诊断与病原检测,对于草鱼出血病的早期诊断与防控有重要意义。该方法较之常规的RT-PCR方法检测草鱼呼肠孤病毒的灵敏度高10倍,达33pg,具有很高的特异性与灵敏度。
   苏岚同学对草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白在毕赤酵母中的表达进行了研究,这是研究草鱼出血病口服疫苗的重要前期基础。构建了草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白毕赤酵母表达载体,并查明了VP6蛋白在毕赤酵母中的表达情况,通过SDS-PAGE检测与western-bloting分析,实现了草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白在毕赤酵母中的表达,表达蛋白可被VP6蛋白多克隆抗体识别。通过构建携带绿色荧光蛋白标记的毕赤酵母表达载体构建,为探索酵母载体通过口服途径在鱼体肠道的吸收吸收与免疫应答过程奠定了基础。
   答辩专家委员会成员分别来自武汉大学、中科院水生生物研究所、华中农业大学、长江水产研究所等单位。三位同学均顺利通过了毕业论文答辩。 |