比较了3 种不同的牙鲆淋巴囊肿病毒纯化方法,优化后的方法如下:剥离囊肿表面薄膜,收集内容物,匀浆后再用超声波细胞破碎仪破碎,反复冻融,650×g、1800×g 差速离心,30 %(W/W)蔗糖垫底超速离心(78 500×g) 浓缩病毒,最后蔗糖密度梯度超速离心(78 500 ×g) 纯化病毒。电镜观察发现,出现在47%~52%蔗糖密度区域的病毒带含有多量、纯净和结构一致的病毒粒子。此外,利用制备的兔抗血清对不同地区的病毒进行了免疫特性分析,Western blotting 检测显示来自威海、青岛及秦皇岛3个地区的淋巴囊肿病毒反应结果是一致的,均有3条蛋白带发生反应,其分子量分别为125、66和55kDa 。[渔业科学进展,2009,30(3):49-54]    作者:程顺峰,绳秀珍,战文斌。(中国海洋大学,青岛农业大学动物科技学院) |