从浙江省湖州地区采集发病草鱼(Ctenopharyngodon idellus)样本中, 取症状明显病料的肝、脾、肾组织, 经过滤除菌处理后接种草鱼肾脏细胞(CIK)。盲传8代, CIK细胞未出现明显细胞病变, 但感染细胞固定后经电镜观察发现, 细胞质内有大量病毒聚集, 病毒无囊膜, 近球形, 直径约70nm, 形态与已报道的草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus, GCRV)相似。将病毒提纯后分别经DNA 酶、RNA酶和绿豆核酸酶消化, 证实为双链RNA(dsRNA)病毒。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示, 病毒基因组由11个dsRNA 组成, 呈现水生呼肠孤病毒基因组典型特征。采用RNA水平3''''末端加接头的方法获得了S6节段的全长序列, 测序结果表明,S6由2030个核苷酸组成, 推测其编码一个分子量约为68.4kD的蛋白。聚类分析结果显示, 该病毒为水生呼肠孤病毒, 但在氨基酸水平上与草鱼呼肠孤病毒代表株873株的差异较大, 同源性为33%, 提示该病毒为一株新型的草鱼呼肠孤病毒。本研究旨在为草鱼出血病防治方法的深入研究奠定基础。[中国水产科学, 2010, 17(6): 1257-1263]    作者:张超,王庆,石存斌,曾伟伟,刘永奎,江海明,吴淑勤。(中国水产科学研究院珠江水产研究所,上海海洋大学水产与生命学院) |