草鱼呼肠孤病毒 JX-0902 株的分离和鉴定-长江水产研究所 长江水产研究所
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草鱼呼肠孤病毒 JX-0902 株的分离和鉴定

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      收集江西南昌地区患典型草鱼出血病的病鱼组织, 进行超薄切片电镜观察, 结果显示, 在脾、肾样品中发现大量病毒颗粒, 病毒无囊膜, 近球形, 直径约 70 nm, 形态与已报道的草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus, GCRV)相似。取病鱼肌肉、内脏研磨, 组织液经离心、过滤除菌后进行鱼体人工感染试验和细胞感染实验, 结果发现, 人工感染试验鱼出现死亡, 且具有典型出血症状 组织滤液感染草鱼肾细胞系(CIK)细胞后, 盲传 6 代未观察到典型细胞病变效应, 但感染细胞固定后经超薄切片电镜观察, 细胞质内有大量病毒存在, 与病鱼组织切片观察到的病毒形态一致。SDS-PAGE 结果进一步揭示, 新分离病毒株(暂命名 JX-0902)基因组由 11 条 dsRNA 组成, 呈现水生呼肠孤病毒基因组典型特征, 但基因组带型与 GCRV 873 株存在差异, 而与 HZ08 株接近。根据 GenBank 上已提交的草鱼呼肠孤病毒 S6 序列(GQ896337)设计特异引物, 以 JX-0902 株的 cDNA 作为模板, 可扩增出特异性条带。基于 S6 序列的聚类分析结果显示, JX-0902 与 GCRV HZ08 株、GD108 株 S6 同源性高达 98%、99%, 该分离株应为草鱼呼肠孤病毒。  [中国水产科学,2011,18(5): 1077 -1083]    作者:刘永奎,王庆,曾伟伟等。  (中国水产科学研究院珠江水产研究所,上海海洋大学,济宁市渔业监测站,南昌县莲塘鱼病防治所)
 
日期:2012-01-09 阅读:次
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