为了进行锦鲤疱疹病毒(Koi HerpesvirusVh-us，KrtV)诊断方法、疫苗研制和蛋白功能研究。通过选择基因保守性极强的ORFI基因作为研究对象，设计1对特异性引物进行PCR克隆。目的基因与表达栽体PET构建重组质粒，将重组质粒转化大肠杆菌E．coliBL21(DE3)后：诱导表达，再将成功表达的目的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体。PCR产物经电泳显示，所扩增的基因长度774bp，与目的基因长度相符。蛋白表达产物经SDS．PAGE和Western．bolt检测，重组表达质粒K1．PET成功诱导表达，表达蛋白为37．3 KD，为包涵体。免疫小鼠获得多克隆抗体，经酶联免疫检测发现其效价达到l：27000。表明表达出的目的蛋白具有免疫原性，实验获得的表达蛋白和多抗血清为KHV的疫苗研制和免疫学检测方法的建立奠定了基础。[中国农业通报 2012,28（05）：98-102]作者：张曼，郑晓聪，林祥梅 （中国检验检疫科学研究院/动物检疫研究所）