根据已报道的草鱼免疫球蛋白 IgM、IgZ 和 IgD 的序列设计表达引物进行 PCR 扩增, 将扩增片段克隆至表达载体 pET-32a, 并在大肠杆菌 Rosetta-gami (DE3)中进行诱导表达。利用亲和层析法纯化表达的重组蛋白, 然后免疫日本大耳白兔, 获得兔抗 IgM、IgZ 和 IgD 的抗血清。经免疫印迹检测, 表明 IgM、IgZ 和 IgD的表达产物能够被兔多克隆抗体特异性识别。应用兔抗草鱼 IgM 和 IgZ 的多克隆抗体, 对草鱼多种器官、组织提取的总蛋白进行免疫印迹检测, 在肠、头肾、中肾、皮肤、脾脏、脑、鳃和血液中都检测到 IgM 和 IgZ的表达。[水生生物学报，2012， 36(5):35-40]    作者：严伟，肖凡书，聂 品    （中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室）