草鱼出血病病毒 VP6 蛋白的原核表达、纯化及免疫效果-长江水产研究所长江水产研究所

为了探讨草鱼出血病病毒（GCRV）VP6 亚单位疫苗对草鱼出血病的免疫保护作用，将vp6基因克隆进原核表达载体 pET-28a(+) ，构建了重组质粒pET28a(+) -VP6。SDS-PAGE和Western-blotting 显示，重组VP6 蛋白的分子量约为43ku，主要以包涵体形式存在，重组蛋白占菌体总蛋白的20%左右 Ni2+柱纯化后的重组蛋白，以每尾500μg 肌肉注射免疫草鱼( 14-20 cm，60-120 g) ，并在第14、21、28、49、70 天通过间接凝集反应检测抗体水平，结果显示，免疫注射后第14天可检测到鱼体产生的特异性抗体，第21天达到最高峰，第70天仍可检测到抗体的存在免疫注射第21天人工接种 GCRV，免疫后的草鱼对出血病的保护力达100%。 [水产学报，2012，36（3）：429-435] 作者：刘林，徐诗英，李婧慧，邹勇，倪金俤，杨鸢劼等（苏州大学基础医学与生物科学学院，江苏省水生动物疫病预防控制中心，南京师范大学生命科学学院）