南方鲇免疫球蛋白单克隆抗体的制备及特性-长江水产研究所 长江水产研究所
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南方鲇免疫球蛋白单克隆抗体的制备及特性

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    采用 PEG 沉淀结合 Sepharose-4B 柱层析法分离纯化了健康非免疫状态下南方鲇血清免疫球蛋白,在 SDS-PAGE 电泳条件下血清免疫球蛋白重链和轻链的分子量分别约为 77 kD 和 27 kD。应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了 4 个南方鲇免疫球蛋白特异性的单克隆抗体细胞株, 并对这些单克隆抗体的特性进行了分析。经抗体亚级份测定, 其中 IgG1 有 2 株, IgG2a 有 1 株, IgG2b 有 1 株 抗体滴度为 104-106, 有三株单抗具有 Western-blot 反应特性, 识别南方鲇免疫球蛋白的重链。4 株单抗都能特异地识别南方鲇、鲇的免疫球蛋白, 而与鲫、草鱼、罗非鱼、斑点叉尾 、光泽黄颡鱼血清以及水产动物常见病原菌如气单胞菌、爱德华氏菌、弧菌、柱状屈桡杆菌、沙门氏菌及大肠杆菌等无任何交叉反应。单克隆抗体 F4-A12 对纯化的南方鲇免疫球蛋白的检测灵敏度为 31 ng。实验结果证明这些单抗具有高度特异、高度灵敏等特点, 可用于南方鲇免疫球蛋白的结构分析、免疫应答水平监测和病原诊断, 具有广阔的应用前景。[水生生物学报,2012,36(3):379-384]    作者:张小萍 魏 静 邱 艳。(西南大学生命科学学院,西南大学三峡库区生态环境教育部重点实验室)
 
日期:2012-06-14 阅读:次
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