目的 制备恩诺沙星(EF)的完全抗原,进而为EF单克隆抗体检测试剂盒的研制奠定基础。方法 将小分子的药物EF和鸡血清白蛋白(OVA)以及牛血清白蛋白(BSA)分别采用碳二亚胺法和活化酯法两种不同的偶联方法合成完全抗原,通过紫外特征光谱和抗血清效价对完全抗原的合成效果进行分析。结果 2 种不同的偶联方法均使OVA和BSA与EF偶联成功。偶联方法对于完全抗原的合成效果也存在差异,从紫外吸光率和偶联物结合比判断,OVA采用活化酯法效果好,未经EDA处理的OVA、活化酯法和碳二亚胺法合成的偶联物的结合比分别为10.3、20.7、16.5 而BSA 采用碳二亚胺法效果好,未经EDA处理的BSA、活化酯法和碳二亚胺法合成的偶联物的结合比分别为20.5、24.6 和30.8。血清效价检测发现,以BSA-EF为完全抗原的效价为25600 ,以OVA-EF为完全抗原的效价为6400 ,这表明完全抗原的合成是成功的。结论 2 种不同方法合成的OVA-EF和BSA-EF完全抗原,可以作为免疫原用于制备抗体以及检测时的包被原进行ELISA检测。[免疫学杂志,2008,24(6):703-706]    作者:张庆华,高建忠,熊清明,杨先乐。(上海海洋大学海洋种质资源发掘与利用重点实验室) |