将鲫鱼IRF1基因的ORF与真核表达质粒pcDNA3.1(+)相连,构建了真核重组表达载体,转染并通过G418筛选获得了稳定转染IRF1基因的细胞株。同时利用原核表达系统成功获得了包含鲫鱼IRF1 C端165个氨基酸的多肽,制备了抗鲫鱼IRF1的多克隆抗体。进一步从RNA和蛋白水平证明,在稳定转染IRF1基因的细胞株中IRF1能够组成型的过量表达,并且IRF1的过量表达伴随IFN基因的表达水平增强。同时PolyI:C的诱导能使稳定表达IRF1的细胞中干扰素系统基因STAT1和IFI58的表达显着增强。研究结果表明,过量表达IRF1能调控鲫鱼IFN以及ISG基因的表达。[水生生物学报,2008年,第32卷,第4期,509-514]    作者:史燕、赵哲、张义兵等人。(中国科学院水生生物研究所  淡水生态与生物技术国家重点实验室  中国水产科学院珠江水产研究所) |