根据GenBank 上WSSV 囊膜蛋白基因vp28 的序列,设计合成引物,PCR 扩增得到vp28 基因,成功构建重组表达载体pBAD/gIIIA-VP28 并转化大肠杆菌E. coli。用L-阿拉伯糖在37℃诱导重组基因工程菌,表达产物经SDS-PAGE 和Western-blot 检测,显示有与预期大小31kDa 相符合的目的蛋白。荧光显微镜方法分析显示,表达的VP28 可与克氏原螯虾血细胞结合。结果表明,在合适的培养条件下,构建的重组表达载体pBAD/gIIIA-VP28 不仅能够表达vp28 基因,而且表达的VP28具有很高的抗原结合活性。[渔业科学进展,2009,30(4):44-49]    作者:陈文博,谭珍一,刘庆慧,侯林,黄倢。(中国水产科学研究院黄海水产研究所,辽宁师范大学) |