根据相近物种的同类基因设计引物,从凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei 肌肉组织中克隆获得原肌球蛋白基因(T PMS) ,长度为901 bp ,其中包含长度为852 bp 的完整开放阅读框,编码原肌球蛋白分子量为32.8 kDa RT-PCR 结果显示,原肌球蛋白在心、肝胰腺、胃、鳃、肠和肌肉组织中均有表达,在肌肉中表达量最高,在鳃中表达量最低将原肌球蛋白基因构建原核重组表达载体T PMS-pET30a ,转化受体菌株BL21(DE3) 并利用IPTG 诱导后能够大量表达,蛋白分子量为38.2 kDa 经优化, IPTG的最适诱导浓度为0.05mmol/ L ,最适诱导时间为4h 经过亲和纯化后,能够得到纯度90 %以上的重组表达蛋白。[渔业科学进展,2009,30(4):38-43]    作者:杜欣军,张伟伟,孙伟英,王硕。(天津科技大学食品工程与生物技术学院) |