根据实验室分离的大黄鱼弧菌病主要病原菌哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)GYC1108-1 株的胞外蛋白酶基因序列, 设计胞外蛋白酶基因(ΔProA)特异性引物, 扩增获得1552 bp 的ΔProA 基因, 克隆于pUC57-T 载体将ΔProA 基因亚克隆到原核表达载体pET-28a 进行融合表达, SDS-PAGE 电泳检测发现, ΔProA 融合蛋白经IPTG 诱导后在大肠杆菌中以包涵体形式表达, 分子量大小约55 kD, 诱导5h 的表达蛋白产量约占细菌总蛋白的21%。Western blot 分析, 表达的55 kD 蛋白具有较高免疫原性。用纯化的ΔProA 融合蛋白对大黄鱼进行免疫试验, 结果免疫保护率达到75%。[水生生物学报,2010,34(1):152-156]    作者:潘晓艺,沈锦玉,余旭平,许文军,曹铮,尹文林,郝贵杰。(浙江大学,浙江省淡水水产研究所,浙江省海洋水产研究所) |