应用RT-PCR 方法扩增了IPNV 编码内衣壳VP3 蛋白的基因615 bp，将VP3 基因克隆至原核表达载体pET30b，并在大肠杆菌BL21 中得到了表达。通过SDS-PAGE 分析表明，重组菌诱导后得到了预期大小约30 ku 的VP3 蛋白，与理论值相符，经薄层扫描分析表明目的蛋白表达量可占菌体总蛋白的30%。用镍离子亲和层析柱纯化可溶性的VP3 蛋白，并制备抗血清。Western-blotting 结果显示，VP3 蛋白可被兔抗IPNV 阳性血清识别间接ELISA 结果显示，IPNV细胞培养物作为抗原，兔抗VP3 蛋白高免血清稀释度为1∶ 25 600 时，P /N > 2，抗血清可与IPNV 全病毒发生反应，以上两项结果说明，表达的VP3 蛋白与天然的IPNV VP3 蛋白一样具有相同的抗原性。试验利用原核表达系统成功地高效表达了IPNV VP3 蛋白，融合蛋白以可溶性形式存在，并制备了高效价的抗血清。[水产学报，2010，34（4）：604-610]    作者：赵丽丽，刘敏，哈卓，刘巍巍，赵永欣，葛俊伟，乔薪瑗，李一经。（东北农业大学动物医学学院）