参照GenBank 上登录的弧菌鞭毛蛋白flaB 基因序列设计引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株的flaB 全长基因, 序列分析结果显示该基因为1134 bp, 编码377个氨基酸。与GenBank中其它弧菌的同源基因序列比对显示,溶藻弧菌flaB 基因与副溶血弧菌flaB 基因的同源性最高( 92% ) 。将该基因定向克隆到原核表达载体pET-32a ( + )中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出带His-tag 的融合蛋白, 分子量大小与预期一致。优化的表达条件为28℃, 0. 4 mm ol /L IPTG浓度诱导10h。用纯化后的融合蛋白免疫SPF级小鼠,制备了多克隆抗体。Western-b lotting结果表明鼠抗FlaB血清不仅能与诱导后的重组蛋白发生反应,而且能与天然的溶藻弧菌全菌蛋白发生反应,提示鞭毛蛋白FlaB 可能是溶藻弧菌的重要保护性抗原之一,为下一步进行FlaB蛋白免疫原性的研究以及疫苗的制备奠定了基础。[水产学报，2010，34（1）：139-146]    作者：梁海鹰，夏立群，吴灶和，简纪常，鲁义善。（中国科学院南海海洋研究所，广东海洋大学水产学院，广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，广东省水产经济动物病害控制重点实验室，中国科学院研究生院）