新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus, SGIV)是导致石斑鱼养殖严重经济损失的主要病原体。本研究构建了含有新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus, SGIV)ORF086基因的重组表达质粒载体pET32a-ORF086,将其转化到大肠杆菌中进行融合表达, 经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,证实重组大肠杆菌融合表达了SGIV ORF086蛋白。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isop rophl-thio-β-D-galactopyranoside, IPTG)浓度、诱导温度、诱导时间等诱导表达条件的优化,确定在0.7mmol/L IPTG、16℃诱导14h时可溶性SGIV ORF086重组蛋白占重组蛋白的60%。经镍琼脂糖凝胶柱纯化重组蛋白,纯化度达95%以上。用纯化的SGIV ORF086蛋白免疫小鼠,获得了高效特异的SGIV ORF086抗血清。[上海海洋大学学报,2010,19(1):1-6]    作者:夏立群,张红莲,梁海鹰,刘森林。(广东海洋大学水产学院,中山大学生命科学学院) |