中华鳖( Trionyx sinensis)细菌性疾病主要由气单胞菌感染引起的,通过脱脂奶平板检测及酶活性试验得出温和气单胞菌TL97528株分泌的胞外蛋白酶为丝氨酸蛋白酶,而丝氨酸蛋白酶是气单胞菌的主要毒力因子。根据已发表的嗜水气单胞菌的丝氨酸蛋白酶基因序列保守区域设计引物, PCR扩增出一长度为809 bp大小的特异片段,该序列在Genbank上的登录号为FJ357446。对该序列进行分析发现,已发表的温和气单胞菌(Aerom onas sobria)丝氨酸蛋白酶基因(GenB ank登录号为A F253471)同源性为98%、与其他几株已发表的嗜水气单胞菌(Aerom onas hydrophila ) 丝氨酸蛋白酶基因( GenB ank 登录号分别为A F126213、A Y841795、DQ127822、CP000462、CP000644、A F159142)同源性分别为98%、82%、82%、82%、81%、81% , 与杀鲑气单胞菌(Aerom onas salm onicida)丝氨酸蛋白酶基因(GenB ank登录号为X67043)同源性为80%。用DNA star软件分析,与鳖源温和气单胞菌TK961010株的同源性为98%,与鱼源嗜水气单胞菌BSK-10、TPS-30和J-1株有较高的同源性,均为81%。同时分析了丝氨酸蛋白酶基因的进化关系,发现中华鳖分离的气单胞菌TL 97528株与TK961010株关系较近从鱼分离的气单胞菌BSK-10、TPS-30和J-1株聚为一簇,亲缘关系较近。[上海海洋大学学报,2010,19(2):151-156]    作者:沈锦玉,李新华,潘晓艺,尹文林,曹铮。(浙江省淡水水产研究所) |