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      本研究根据其他鱼类MHC-Ⅱα基因的保守序列设计兼并引物, 运用同源克隆和末端快速扩增方法扩增了军曹鱼MHC-Ⅱα基因的全长cDNA序列, 并对cDNA及其氨基酸序列进行了分析, 比较了军曹鱼和其他物种的MHC-Ⅱα氨基酸序列的差异, 分析了军曹鱼MHC-Ⅱα基因的组织分布及经LPS 刺激后头肾组织中MHC-Ⅱα基因的表达变化。结果表明, 军曹鱼MHC-ⅡαcDNA 全长998 bp, 包括53bp的5’末端非编码区( 5’UTR) 、234 bp 的3’末端非编码区( 3’UTR) 及711 bp 的开放阅读框(ORF) , 编码236 个氮基酸, 其蛋白质分子质量约为25. 94 ku, 等电点为4. 39 军曹鱼MHC-Ⅱα蛋白质序列具有一些重要的特征, 包括前导肽、α1、α2、CP/ TM/ CYT 区和保守的半胱氨酸等 军曹鱼MHC-Ⅱα与鼠、人及其它鱼类的氨基酸同源性在25. 0%~69. 5%之间。Realtime PCR 检测结果显示, MHC-Ⅱα基因在正常军曹鱼组织中均有表达, 但其表达量在各种组织中存在差异, 其中较强表达于头肾、鳃, 中等程度表达于脾脏、肠, 在心脏、脑、肌肉中表达较弱 经LPS 刺激后, 头肾中MHC-Ⅱα基因表达下调。[中国畜牧兽医,2010,37(10):48-57]    作者:茅莉娜,冯娟,李玉谷,侯月娥,郭志勋,许海东。(华南农业大学兽医学院,中国水产科学研究院南海水产研究所) | |