近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis)热休克蛋白70(HSP70)家族成员是重要的抗逆和潜在污染预警分子。本研究将近江牡蛎HSP70基因cDNA连接到原核表达载体pQE30中，构建近江牡蛎HSP70的重组表达质粒pQE30／HSP70。该重组质粒经酶切和测序鉴定后，转入表达宿主大肠杆菌M15进行诱导表达，经SDS-PAGE电泳和Western blot分析表明，确实获得了重组蛋白的表达。分别在25℃、30℃和37℃下，经0.2mmol／L IFFG诱导融合蛋白表达，其中，在25℃下，诱导的融合蛋白表达量最高，表明该温度为恰当诱导温度；在25℃下，分别诱导重组蛋白表达2 h、4 h、6 h、8 h、12 h和16 h，其中诱导12 h的蛋白表达量最高；大部分融合蛋白以可溶形式存在于大肠杆菌M15中；表达的重组融合蛋白分子量约69 kD，并能与鼠源抗6×His的单克隆抗体特异性结合，表明通过原核表达获得了近江牡蛎HSP70蛋白。实验表明，在25℃下，经0.2mmol／LIPTG诱导表达12h，可获得大量可溶近江牡蛎HSP70蛋白。[中国水产科学，2010，17(3)：424-430]    作者：李薇，张其中，张占会，崔淼，姚占娟，何毛贤。（暨南大学水生生物研究所，中国科学院南海海洋研究所）