从蛙虹彩病毒(Rana grylio virus, RGV)中克隆出一个虹彩病毒科的序列保守基因RGV-12L, 序列分析表明该基因全长894bp,编码一个含297个氨基酸的多肽,分子量为33kD。构建包含该基因全长的原核表达载体, 进行原核表达, 获得了分子量约53 kD 的融合蛋白。将融合蛋白经腹腔注射免疫小鼠, 制备出鼠抗RGV-12L血清。通过RT-PCR 和Western blotting 分析RGV感染细胞后RGV-12L的转录时序, 感染4h可以在RNA水平检测到RGV-12L 的转录, 感染8h可以在蛋白水平检测到RGV-12L 的表达。用DNA 复制抑制剂阿糖胞苷(Arac)进行药物抑制实验,鉴定出RGV-12L是一个晚期基因。免疫荧光分析显示RGV-12L分布于感染细胞的细胞核和细胞质中, 在病毒加工厂中也有该蛋白的分布, 提示该基因可能与病毒的装配、释放有关。[水生生物学报,2010,34(6):1166—1171]    作者:何利波,柯飞,张奇亚。(中国科学院水生生物研究所,中国科学院研究生院) |