根据GenBank 中草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus, GCRV)VP6 蛋白的全基因序列(AF403394)和大肠杆菌不耐热肠毒素B 亚单位(LTB)的基因序列(M17874), 设计并合成特异性引物, 从感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肾细胞(CIK)中提取病毒核酸作为模板, 进行RT-PCR 扩增, 得到约1.3 kb 的GCRVVP6 基因读码框片段, 同时提取大肠杆菌(Escherichia coli)H44815 全基因组作为模板, 进行PCR 扩增得到约370 bp的LTB 基因读码框片段。将获得的2 个目的片段分别克隆到pCR2.1 载体上, 经酶切、PCR 扩增检测和序列测定确认后, 将其克隆到携带绿色荧光蛋白标记的植物表达载体pCAMBIA1302 上, 成功构建了可将草鱼呼肠孤病毒VP6 蛋白、大肠杆菌不耐热肠毒素B 亚单位(LTB)、绿色荧光蛋白(GFP)融合表达的植物载体pCAMBIA1302-LTB-VP6。本研究旨为草鱼出血病可饲化转基因植物疫苗研制奠定基础。[中国水产科学, 2011, 18(1): 1𕒻]    作者：周勇，曾令兵，范玉顶，罗晓松，肖艺。（中国水产科学院长江水产研究所，华中农业大学）