提取了哈维氏弧菌( Vibrio harveryi) 感染的杂色鲍(Haliotis diversicolor Reeve) 总RNA, 采用SMART方法合成双链cDNA, 并用双链特异核酸酶进行均一化处理。割取0.5~1.0和1.0~3.0kb的片段分别连接pDNR-LIB 并转化大肠杆菌(Esherichia coli), 最终构建2种片段大小的杂色鲍全组织均一化cDNA 文库。2文库库容均在2. 5×105cfu mL- 1左右, PCR检测阳性重组率为100%。随机挑取200个克隆测序, 获得高质量EST序列174条。组装后得到149条Unigenes, 冗余率为14.37%。序列注释结果表明, 有39条Unigene 序列与已知基因高度相似。综上所述, 文章所建cDNA文库质量良好, 可以满足后续研究工作的需要。[南方水产,2010,6(5):37-42]    作者:姜敬哲,张微,王江勇,王瑞旋,刘广锋。(中国水产科学研究院南海水产研究所,中山大学) |