采用同源克隆和RACE 技术获得西伯利亚鲟(Acipenser baerii)β -actin 基因cDNA 全长, 序列分析表明西伯利亚鲟β -actin 基因cDNA 全长1 322 bp, 其包括的137 bp 的5′端非翻译区, 57 bp 的3′端非翻译区和编码375个氨基酸残基的1 128 bp 开放阅读框。与其他物种比对, 该基因具极高的保守性。同时也利用同源克隆技术获得了西伯利亚鲟Sox2 基因的同源保守区, 该序列长768 bp, 编码256 个氨基酸, 也具较高的保守性, 与其他物种的相似性在70%以上。以β -actin 作为内参基因, 对Sox2 基因在西伯利亚鲟成鱼各组织及胚胎发育各时期进行实时荧光定量PCR 检测, 发现Sox2 基因在不同组织中均有表达。其中, 在肝、胰、肾、脑4 个组织中表达量差距不大, 均处于相对较低的水平, 在肌肉组织中表达量最高, 达到了肝脏的10.4 倍。同时Sox2 基因虽在西伯利亚鲟胚胎发育各时期均有表达, 但表达也具明显的时间差异性。在受精卵期、囊胚期Sox2 基因的相对表达量较低, 在原肠期、神经胚期、视泡形成期和心脏形成期Sox2 基因相对表达量较高, 且在心脏形成期达到最高点。本研究为量化西伯利亚鲟发育分化过程中相关基因提供了坚实的参照工具, 增加了后续试验的可信度, 同时可为今后深入研究西伯利亚鲟Sox2 在侧线神经节分化发育、细胞迁移过程中的作用提供基础参考依据。[中国水产科学, 2010,17(6): 1173-1182]    作者:施志仪,程千千,宋佳坤。(上海海洋大学水产与生命科学研究院) |