为了研究海水鱼合成高度不饱和脂肪酸(Highly unsaturated fatty acids, HUFAs)的关键酶, 本研究克隆了军曹鱼(Rachycentron canadum)的△6 脂肪酸去饱和酶的部分cDNA 序列。根据GenBank 已公布的其他鱼类的△6脂肪酸去饱和酶cDNA 序列进行分析, 设计了一对用于PCR 扩增军曹鱼的△6 脂肪酸去饱和酶基因保守序列的引物 然后以军曹鱼肝总RNA 为模板, 通过RT-PCR 的方法扩增出一段长度为743 bp 的片段, 该片段经纯化后,连接至pMD18-T 载体上进行测序。结果显示, 该片段与欧洲狼鲈(Dicentrarchus labrax)△6 脂肪酸去饱和酶基因的覆盖区同源性为90.4%, 该蛋白结构含有2 个组氨酸保守区(HDFGH 和HFQHH)和2 个跨膜结构域, 具有典型的△6 脂肪酸去饱和酶结构特点。通过荧光定量PCR(Real-time quantity PCR, RTQ-PCR)检测该基因在军曹鱼幼鱼不同组织中的表达量, 发现△6 脂肪酸去饱和酶基因在军曹鱼脑的表达量最高 其次是肝 再其次是心、肠、脾、肾、鳃 而肌肉和皮肤的表达量相对较低, 在脂肪组织中没有检测到△6 去饱和酶基因的表达。结论为, 军曹鱼具有合成HUFAs 的关键酶—△6 脂肪酸去饱和酶, 在其所有组织中以脑之含量最多。[中国水产科学,2010,17(6): 1183-1191]    作者:许友卿,郑一民,丁兆坤。(广西大学水产科学研究所) |