坎氏弧菌（Vibrio campbellii）是水产养殖动物的重要致病菌。本研究构建了坎氏弧菌热不稳定溶血素（TLH）基因的重组表达质粒pET26b（+）/tlh，并转入大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达带有6个组氨酸的TLH融合蛋白，然后利用Ni琼脂糖亲和层析柱进行纯化。SDS-PAGE分析显示，该溶血素能够大量表达，分子量约为42 kD。纯化的TLH（0.41 mg/mL）具有较强的溶血活性（溶血圈直径为16 mm）及磷脂酶活性（晕圈直径为15 mm）。其溶血活力的最适温度为37℃，在75℃下培养30 min即丧失活力；最适pH为6，pH大于或小于6时都会导致其稳定性下降；一价金属离子如Na+、K+对溶血活性几乎没有影响，而部分二价金属离子如Ca2+、Co2+会导致溶血活性降低。本研究结果对阐明坎氏弧菌的致病机理及基因工程疫苗开发有重要意义。[中国水产科学，2010，17（4）：745-752]    作者：孙婧，孙铂光，贾爱荣，张晓华。（中国海洋大学海洋生命学院）