本研究采用RT-PCR方法对生长快、耐盐性弱的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus),耐盐性强、生长慢的萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron)以及生长与耐盐均较优的杂交子代(O. niloticus ♀×S. melanotheron ♂)的催乳素PRLI 基因cDNA序列片段进行了克隆与序列分析,以探讨罗非鱼耐盐性的分子机制,分析和筛选与耐盐性相关的基因。主要结果:( 1)序列克隆及ClustalX1.83分析表明克隆所得cDNA序列长度为339bp,编码112个氨基酸。(2)3种罗非鱼PRLI的cDNA具有高度的保守性,核苷酸序列同源性介于97.94% ~ 99.71%之间,氨基酸序列同源性均在99.11%以上,表明罗非鱼的PRLI 基因具有高度保守性。(3)杂交子代同尼罗罗非鱼的cDNA 序列相比有5 个碱基的变异,变异比例为1.47%;同萨罗罗非鱼相比有1个碱基的变异,变异比例为0.30%。(4)尼罗罗非鱼推导氨基酸序列中第80位氨基酸残基为脯氨酸残基(P),而杂交子代和萨罗罗非鱼在该位点均为丝氨酸残基(S)。(5)MEGA4系统进化树分析显示,杂交子代同萨罗罗非鱼聚为1支。结果(3)、(4)、(5)表明,在PRLI 基因的表达方面,杂交子代同父本萨罗罗非鱼的关系较近。[中国水产科学,2010,17(3):414-423]    作者:孟庆辉,李思发,范武江,王兵。(上海海洋大学) |