根据感染哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的大菱鲆(Scophthalmus maximus)的差减cDNA 文库中hsp70 EST序列设计引物, 用RACE 方法首次克隆到长2188 bp 的大菱鲆HSC70 (Heat-shock cognate protein 70)全长cDNA 序列, 包括1956 bp 的开放阅读框及5′和3′非翻译区。在预测的651 个氨基酸序列中发现了Dnak 特征性基序, 胞质HSP70 特征基序以及四肽简并重复序列。与其他真核生物HSP70 家族成员进行同源性比较,发现大菱鲆HSC70 与牙鲆(Paralichthys olivaceus) HSC71、虹鳟(Oncorhynchus mykiss) HSC71、人(Homo sapiens) HSC70、家鼠(Mus musculus) HSC70、烟草天蛾(Manduca sexta) HSC70 的氨基酸相似性分别是97%,95%, 94%, 93%, 86%, 表现出较高的保守性。表达分析显示, hsc70 mRNA 在大菱鲆正常肝脏、鳃、肠、脾脏、头肾、肾等组织中以不同的水平存在, 呈组成型表达 被哈维氏弧菌感染后, 大菱鲆肝脏和脾脏组织hsc70 mRNA 表达水平分别在24h 和12h 出现上调(2.5-fold 和1.6-fold) 注射生理盐水组与未注射组之间差异不显着。[水生生物学报,2010,34(3):547-553]    作者:贾爱荣,王传娟,张晓华。(中国海洋大学海洋生命学院) |