原核重组表达的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)溶菌酶蛋白主要以包涵体形式存在, 经变性和复性处理后活性仍较差。研究将凡纳滨对虾溶菌酶基因(Lvlyz基因)克隆至毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,电击转化毕赤酵母GS115细胞, 经组氨酸营养缺陷培养基筛选和PCR 检测获得转化子。对其进行连续甲醇诱导表达, 利用SDS-PAGE和C端携带的6×His标签, 对发酵液上清进行Western blot检测, 结果表明19.3 kD左右的条带即是重组表达的溶菌酶蛋白。用溶壁微球菌平板抑菌法鉴定表达产物具有较强的抑菌能力。研究首次利用毕赤酵母真核表达系统实现对虾溶菌酶基因的可溶性表达, 并且表达产物的活性良好。[水生生物学报,2010,34(6):1091-1096]    作者:卞曙光,陈华新,姜鹏,张海波,刘兆普,秦松。(南京农业大学海洋生物学江苏省重点实验室,中国科学院海洋研究所,上海海洋大学水产与生命学院) |