实验利用灭活的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)诱导处于四龄池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)14h，将诱导后的池蝶蚌血细胞的总 RNA进行逆转录，用LD-PCR法合成双链 cDNA，从而首次成功构建池蝶蚌血细胞的全长cDNA 文库。原始文库的滴度为4×10⁶cfu/cm³，重组率为 90%，扩增后文库的滴度为3.55×10⁹pfu/mL。目前文库已随机测序672个样品，将所得双向序列进行拼接，去除载体，并多序列比对去除重复序列后，发现436 条为已知功能序列，其余为未知功能序列。序列中最小长度270 bp，最大长度为2153 bp，平均大小608.6 bp，表明插入片段大小理想。从文库中筛选获得免疫相关基因池蝶蚌亲环蛋白A(HsCyp A)全长基因并进行序列分析。结果显示，HsCyp A 全长1229 bp，序列包括52 bp 的5′非编码区、495bp的开放阅读框、682bp的3′非编码区和29bp的poly(A)尾，没有明显的加尾信号。对Cyp A 氨基酸序列二级结构进行了较详细的分析并进行了三维建模，同时构建了其系统进化树, 分析表明亲环蛋白家族是一个在进化上非常保守的蛋白家族。综合分析，Cyp A在水生动物中不仅仅只是一种组成型蛋白，而是可能在病原感染防御中发挥重要作用。[水生生物学报，2011，5（35）：783-789]    作者：谢 凯，徐 灵，盛军庆等。(南昌大学生命科学与食品工程学院)