鲤免疫应答相关基因的克隆与鉴定-长江水产研究所长江水产研究所

为研究鲤(Cyprinus carpio L.)白细胞免疫应答相关的分子机理, 以体外培养的鲤外周血白细胞为实验材料,用荧光标记的 mRNA 差异显示(FluoroDDRT-PCR)技术, 研究丝裂原(50 μg/mL LPS、50 μg/mL PHA 和 50 μg/mL ConA)在刺激白细胞 4、12 和 24 h 内诱导白细胞免疫应答相关基因的 mRNA 表达差异, 共获得 92 个差异片段, 其中 87 个片段有再扩增产物, 再扩增率为 94.6% 将差异片段克隆, 经 PCR 鉴定, 获得 81 个阳性克隆, 鉴定率为93.1% 差异片段序列同源性功能分析结果表明, 本研究共获得 3 个免疫应答相关的 cDNA 克隆, 它们分别编码鲤的蛋白酶体激活因子 PA28α亚基、翻译延伸因子(EF-1α)和基质金属蛋白酶 13(Mmp13)部分序列, 为进一步研究这些差异表达基因在鱼类免疫中的作用机制奠定了基础。 [中国水产科学，2011，18(5): 1179 -1188] 作者：丰培金，王文东，李伟等。（临沂大学生命科学学院，吉林大学人兽共患病研究所）